Calculo de pasos con la formula de Lefkowitz versus la de Nikon Microscopy
Publicado: Lun Feb 24, 2020 10:12 pm
Este asunto surgió en este post https://foromacrosmuymacros.com/viewtopic.php?f=7&t=688 , a tenor de que:
Juan Carlos Martín el Mié Feb 19, 2020 2:45 pm dice:
Muy buena esa imagen. Me encanta todo ese contraste. Eres uno de los pocos que ponen todos los datos del apilamiento porque obliga a pensar y a cuestionar tus esquemas. En gran parte de tus apilamientos (me he fijado en prácticamente en todos) la distancia de los pasos es bastante inferior a la que propone Nikon https://www.microscopyu.com/tutorials/depthoffield y después de aplicar un solapamiento del 20%, lo que supone casi, en algunos, casos duplicar el número de fotos necesarias. Sé que siempre andamos para atrás y para delante con estos conceptos que creemos tener claros pero no entiendo de dónde obtienes los cálculos.
A lo que Quenotean contesta, dando una explicación muy precisa de como aplica los cálculos de Lefkowitz:
Pues yo uso la fórmula de Lefkowitz para calcular los pasos:
2*CoC*f*((m+1)/(m*m))
donde
CoC = Círculo de Confusión; como norma… Cámaras F.F. => CoC = 0,030 Cámaras APS-C => CoC = 0,020 Cámaras Micro 4/3 => CoC = 0,015
m = magnificación real (1X, 2X, etc.)
f = abertura (f2.8, f4, etc.)
Por ejemplo, para 2x y f4 en una cámara F.F. se calcularía: 2*0,030*4*((2+1) / (2*2)) = 0,06*4*0,75= 0,18mm.
Esta sería la profundidad de campo de cada toma, pero solapando cada disparo un 20% para facilitar el trabajo al software de apilado multiplicamos por 0,80 el resultado y obtenemos 0,144mm, que sería el desplazamiento entre disparos
Para objetivos de microscopio, no hay abertura f convencional, por tanto depende del NA (abertura numérica dada por el fabricante) y es fijo
Para saber la abertura f convencional equivalente para poder usar la fórmula de Lefkowitz, hay que calcular antes el f efectivo del objetivo de microscopio mediante esta fórmula: fe = M / (2*NA), y luego el f equivalente: f = fe / (M+1)
En el caso de la foto de este hilo
Como está hecha con una cámara Canon EOS 50D (APSc) y el Nikon BD Plan 10x- 0.25 a 9,8x, por tanto tiene el siguiente f efectivo: fe= 9,8/(2*0,25) = 19,6
por lo que tiene el siguiente f equivalente: f= 19,6 / (9,8+1) = 1,8
Ahora aplico la fórmula de Lefkowitz para calcular los pasos: =(2*0,02*1,8*((9,8+1)/(9,8*9,8))*0,8)= 0,006477301mm, o lo que es lo mismo 6,477301 micras (una vez lo multiplicas por 1000)
De ahí salen los cálculos
Y responde Juan Carlos Martín:
Por ejemplo en tu apilado "Detalle escamas ala de mariposa 50x" con el objetivo Nikon M Plan 60x ELWD 0.70 y una ampliación de 50X, aplicas pasos de 0,47 µm. Según la fórmula de Nikon (aplicada al tamaño de los píxeles del sensor de Canon EOS 50D):
Dtot = 0,55/(0,7.0,7)+2.4,69/(50.0,7) = 1,49 µm
Dtot.0,8 = 1,19 µm
La diferencia entre aplicar una u otra fórmula es muy notable. Siempre he aplicado la fòrmula de Nikon para objetivos de microscopio y dejo Lefkowitz para lo demás. Nunca he visto (no sé como se diría) discontinuidades, incongruencias, en las imágenes apiladas.
Juan Carlos Martín el Mié Feb 19, 2020 2:45 pm dice:
Muy buena esa imagen. Me encanta todo ese contraste. Eres uno de los pocos que ponen todos los datos del apilamiento porque obliga a pensar y a cuestionar tus esquemas. En gran parte de tus apilamientos (me he fijado en prácticamente en todos) la distancia de los pasos es bastante inferior a la que propone Nikon https://www.microscopyu.com/tutorials/depthoffield y después de aplicar un solapamiento del 20%, lo que supone casi, en algunos, casos duplicar el número de fotos necesarias. Sé que siempre andamos para atrás y para delante con estos conceptos que creemos tener claros pero no entiendo de dónde obtienes los cálculos.
A lo que Quenotean contesta, dando una explicación muy precisa de como aplica los cálculos de Lefkowitz:
Pues yo uso la fórmula de Lefkowitz para calcular los pasos:
2*CoC*f*((m+1)/(m*m))
donde
CoC = Círculo de Confusión; como norma… Cámaras F.F. => CoC = 0,030 Cámaras APS-C => CoC = 0,020 Cámaras Micro 4/3 => CoC = 0,015
m = magnificación real (1X, 2X, etc.)
f = abertura (f2.8, f4, etc.)
Por ejemplo, para 2x y f4 en una cámara F.F. se calcularía: 2*0,030*4*((2+1) / (2*2)) = 0,06*4*0,75= 0,18mm.
Esta sería la profundidad de campo de cada toma, pero solapando cada disparo un 20% para facilitar el trabajo al software de apilado multiplicamos por 0,80 el resultado y obtenemos 0,144mm, que sería el desplazamiento entre disparos
Para objetivos de microscopio, no hay abertura f convencional, por tanto depende del NA (abertura numérica dada por el fabricante) y es fijo
Para saber la abertura f convencional equivalente para poder usar la fórmula de Lefkowitz, hay que calcular antes el f efectivo del objetivo de microscopio mediante esta fórmula: fe = M / (2*NA), y luego el f equivalente: f = fe / (M+1)
En el caso de la foto de este hilo
Como está hecha con una cámara Canon EOS 50D (APSc) y el Nikon BD Plan 10x- 0.25 a 9,8x, por tanto tiene el siguiente f efectivo: fe= 9,8/(2*0,25) = 19,6
por lo que tiene el siguiente f equivalente: f= 19,6 / (9,8+1) = 1,8
Ahora aplico la fórmula de Lefkowitz para calcular los pasos: =(2*0,02*1,8*((9,8+1)/(9,8*9,8))*0,8)= 0,006477301mm, o lo que es lo mismo 6,477301 micras (una vez lo multiplicas por 1000)
De ahí salen los cálculos
Y responde Juan Carlos Martín:
Por ejemplo en tu apilado "Detalle escamas ala de mariposa 50x" con el objetivo Nikon M Plan 60x ELWD 0.70 y una ampliación de 50X, aplicas pasos de 0,47 µm. Según la fórmula de Nikon (aplicada al tamaño de los píxeles del sensor de Canon EOS 50D):
Dtot = 0,55/(0,7.0,7)+2.4,69/(50.0,7) = 1,49 µm
Dtot.0,8 = 1,19 µm
La diferencia entre aplicar una u otra fórmula es muy notable. Siempre he aplicado la fòrmula de Nikon para objetivos de microscopio y dejo Lefkowitz para lo demás. Nunca he visto (no sé como se diría) discontinuidades, incongruencias, en las imágenes apiladas.
